一舉攻略膠原蛋白的三種分子量指標

膠原蛋白(或稱膠原胜肽、膠原寡肽),在近十多年來以口服補充劑型式成為主流,因為它作為抗衰老的一種有效成分,廣被消費者所認同,口服水解膠原蛋白(hydrolyzed collagen) 有機會在皮膚深層,改善皮膚生理和外觀,增加水分、彈性、緊緻度,減少皺紋,使皮膚恢復青春。

當您在開發美肌產品(無論是人用保健、美妝保養、甚至寵物毛皮保健等)、或選購市售膠原保健商品時,一定聽過這些觀念:「小分子好吸收」「分子量XX道爾頓(dalton)」。但您是否知道?分子量具有數種不同的指標,而這些指標反映了膠原胜肽的特性。本文將帶您逐步了解。

膠原蛋白如何讓皮膚恢復健康?

體內膠原蛋白的流失始於18歲之後,40歲後人體每年會損失約1%的膠原蛋白,而到80歲左右,與年輕人相比,體內膠原蛋白的產生總量會下降75% 1。體內膠原蛋白的流失,除了年齡因素之外,也有其他因素導致這種情況,例如生物體內的自由基、飲食不良、吸菸、酗酒和疾病等。補充足量的蛋白質及膠原蛋白,有助於減緩膠原蛋白的流失,使皮膚恢復光彩,使結締組織(如肌腱、韌帶、牙齦、頭皮、血管等處的結締組織)恢復健康,更可促進傷口和組織的癒合。

根據研究 1,水解膠原蛋白在真皮中以兩種不同的形式發揮作用。在第一個形式中,游離胺基酸為膠原蛋白纖維和彈性蛋白纖維的形成,提供最基本的架構分子。在第二種形式中,膠原蛋白的寡肽鏈作為配體,與纖維母細胞膜上的受體結合,刺激新的膠原蛋白、彈性蛋白和透明質酸的產生。

水解膠原蛋白的製造方式?

天然的膠原蛋白可以從不同的動物來源提取,以牛、豬、魚等來源為大宗。透過酸或鹼處理,將大分子的明膠水解成較小的蛋白片段。酸性和酵素(酶)處理相結合,可以實現更有效率、更精準的膠原胜肽分解製程 。選用適當的水解酶,能夠切出胜肽片段均一、且符合功效目標的膠原胜肽,例如含有二肽PO.OG的小分子水解膠原胜肽,研究證實可増進皮膚健康。
【註】PO(脯胺酸proline-羥脯胺酸hydroxyproline)、OG(羥脯胺酸hydroxyproline-甘胺酸glycine)

圖一 1. Denaturation of native collagen into small low-molecular-weight peptides.

因此,製程條件、透析和萃取來源,是決定最終膠原蛋白特性(如分子量、胺基酸組成和分子結構)的主要因素。而膠原蛋白的胺基酸組成、和水解程度(反應了分子量),則決定了膠原蛋白的功能特性,如抗氧化能力、抗菌活性、和更高的生物可利用性(bioavailability)等。

分子量如何解讀?

承上段所述,因為小分子膠原蛋白的製造是經歷一連串水解的過程,最終由不同大小的肽鏈組成,所以分子量不是一個單一值——而是鏈長與分子量的區間分佈。膠原蛋白的分子量必須計算所有肽鏈分子量的平均值。

Mw1,892 Da
Mn716 Da
Mp623 Da
圖2. 小分子膠原蛋白分子量層析圖譜(GPC/SEC)
*批次間差異為合理現象

上圖是一款小分子膠原蛋白分子量層析圖譜(GPC/SEC)【資料來源:Miracolla® 海の綺肌 水解魚膠原蛋白】。圖譜曲線呈現了肽鏈的分子量區間分佈,前段洗脫出較大分子量的肽鏈、後段洗脫出較小分子量的肽鏈。

既然分子量是區間分佈,為何膠原蛋白商品僅標註單一值「分子量XX道爾頓(dalton)」呢?

首先,要先理解三種分子量指標「Mw」「Mn」「Mp」。

Mw 重量平均分子量/重均分子量 weight-average molecular weight
  • Ni​ 代表相應分子量的鏈數目
  • Mi​ 代表單鏈分子量

意義:

  • 按照各鏈重量的統計平均
  • 偏向高分子量區域,代表樣品中較重的分子對Mw影響較顯著
  • Mw兩側分佈具有同等重量的分子
Mn 數量平均分子量/數均分子量 number-average molecular weight
  • Ni​ 代表相應分子量的鏈數目
  • Mi​ 代表單鏈分子量

意義:

  • 按照分子數目的統計平均
  • 偏向低分子量區域,代表樣品中分子的大小平均值
  • Mn兩側分佈具有同等數量的分子
Mp 最高峰分子量/峰值分子量 peak molecular weight

意義:

  • 最高峰的分子量
  • 用於表示分子量分佈極窄的鏈,代表鏈數量最多的分子量
  • 校正聚合物標準品的波峰就經常以Mp來表示
Mw、Mn、Mp 三者間的關係
  • 一般來說,水解膠原蛋白的分子量分佈非均一,所以 Mw >= Mn
  • 當水解膠原蛋白的分子量範圍愈廣(分佈愈寬),Mw 和 Mn 差距愈大
  • Mp 可能接近 Mn,但不一定相等
Mw、Mn、Mp 三者的應用
  • Mn(數均分子量):衡量平均分子量,影響消化與吸收
  • Mw(重均分子量):反映高分子部分,影響溶液的黏度與膠凝能力
  • Mp(峰值分子量):反映鏈數量最多的分子量,可應用於產品的品質控制
以水解膠原蛋白來說,Mw、Mn、Mp 三者,哪個比較重要呢?
  • Mn更能反映平均分子量,Mn愈小代表整體胜肽分子愈小,人體吸收率愈容易提高
  • Mw受大分子影響較大,Mw可能會高估胜肽的平均分子量,但大分子所帶來的物性和功能性也應列入評估
  • Mp則可作為輔助指標,幫助分析主要胜肽群的分子量範圍

結論

關於原料COA所提供的平均分子量數值,究竟是Mw、還是Mn,主要可由分析方法來做判別,若以黏度測定方式換算分子量,則Mw的機率是比較高的。建議您可以洽詢您的原料供應商以獲取更進一步的資訊。

了解完以上不同的分子量指標後,相信您在開發水解膠原蛋白產品上將更有底氣。選擇具備完整分析數據的水解膠原蛋白——例如【Miracolla® 海の綺肌 水解魚膠原蛋白】,將能幫助您輕易評估出產品的有效性。

本文譯者:漢馨科技MKT
參考來源:
1. Hydrolyzed Collagen-Sources and Applications. Molecules. 2019 Nov 7;24(22):4031. https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6891674/

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